本服务提供
发票
报价单
电子合同
蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白鉴定
-
品 牌
赛默飞
型 号Q Exactive/Q Exactive-plus 质谱仪
-
模 式
-
选 项
- 地 址
北京
-
价 格
1500
- 联系人：易科学客服
- 联系电话：400-086-3999 转 801
-
*联系我时请说明是在易科学看到的，谢谢！
- 详细介绍
仪器简介
利用LC-MS/MS技术对单一胶条（SDS-PAGE）、IP、Co-IP、Pull-down纯化溶液等中等复杂样本进行蛋白鉴定。与传统的蛋白质鉴定中经常用到的MALDI-TOF质谱系统相比，LC-MS/MS方法灵敏度更高、鉴定到的蛋白肽段覆盖率更好、结果更加可信。可用于单一蛋白质和简单蛋白混合物的鉴定。
仪器参数
蛋白质鉴定的原理是基于鸟枪法（Shot-gun），将蛋白条带或者蛋白溶液酶切成肽段混合物，经高效液相色谱分离得到若干较为简单的组分，进入高分辨率质谱仪中进行分析。检索软件根据二级质谱信息与相应的数据库比对，结合匹配度打分及错配过滤，可得到肽段的确切序列，进而拼接出各蛋白的完整序列，从而实现对蛋白的鉴定。
检测项目
可以进行以下样品的鉴定：
1. 1D-SDS PAGE胶条中蛋白的鉴定；
2. 2DE PAGE中蛋白胶点的鉴定；
3. 蛋白表达产物的验证；
4. 免疫共沉淀（Co-IP）样品中蛋白的鉴定；
样品要求
仪器简介
利用LC-MS/MS技术对单一胶条（SDS-PAGE）、IP、Co-IP、Pull-down纯化溶液等中等复杂样本进行蛋白鉴定。与传统的蛋白质鉴定中经常用到的MALDI-TOF质谱系统相比，LC-MS/MS方法灵敏度更高、鉴定到的蛋白肽段覆盖率更好、结果更加可信。可用于单一蛋白质和简单蛋白混合物的鉴定。
仪器参数
蛋白质鉴定的原理是基于鸟枪法（Shot-gun），将蛋白条带或者蛋白溶液酶切成肽段混合物，经高效液相色谱分离得到若干较为简单的组分，进入高分辨率质谱仪中进行分析。检索软件根据二级质谱信息与相应的数据库比对，结合匹配度打分及错配过滤，可得到肽段的确切序列，进而拼接出各蛋白的完整序列，从而实现对蛋白的鉴定。
测试项目
可以进行以下样品的鉴定：
1. 1D-SDS PAGE胶条中蛋白的鉴定；
2. 2DE PAGE中蛋白胶点的鉴定；
3. 蛋白表达产物的验证；
4. 免疫共沉淀（Co-IP）样品中蛋白的鉴定；
样品要求
液体样品（In solution format）
1. 假如样品中蛋白量＞10ug，我们对样品的缓冲体系没有要求；
2. 假如样品中蛋白量＜10ug，样品准备过程中尽量减少SDS等表面活性剂的使用，并注意降低盐浓度；
1D SDS PAGE /2D PAGE gels样品
1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby 以及Silver stain样品均可进行蛋白的鉴定试验；
2. 银染的样品有可能与后续的质谱分析不兼容，我们推荐您使用下面的产品或者实验步骤进行银染实验：
ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)
Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)
3. 银染的样品请不要进行脱色处理
3. 提交样品过程中，注意提供样品的缓冲体系和样品中蛋白的预估含量；
Co-IP样品
1. 如果您洗脱的样品需要跑胶，请按照1D SDS PAGE样品准备要求准备样品即可；
2. 如果您直接提交洗脱样品，我们推荐使用HPH EB (0.5 M NH4OH, 0.5 mM EDTA) 缓冲体系进行最后一步蛋白的洗脱，保证洗脱缓冲体系与后续的质谱实验兼容；
样品运输
我们推荐您将样品冻干后进行运输，冻干样品中蛋白非常稳定；
液体样品推荐干冰运输，短途运输冰袋也可以；
注意：
利用质谱进行蛋白样品的鉴定，在样品准备过程中需佩戴手套和头套，尽量避免自身角蛋白（keratin）对样品的污染。
结果实例
易科学优势
QQ在线客服
