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SDS-PAGE 变性蛋白质凝胶电泳

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SDS-PAGE 变性蛋白质凝胶电泳

  • 品 牌

    Bio-Rad 伯乐

    型 号

    垂直电泳槽mini

  • 模 式

    • 选 项

      • 地 址

        北京

      • 价 格

        80

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  • 详细介绍
仪器简介

十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)是较常用的一种分离蛋白质的技术。SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此,各种蛋白质-SDS 复合物在电泳时的迁移速度仅由蛋白质分子量决定 ,不同的蛋白质由于分子量的差异经过SDS-PAGE电泳后分离,再经由蛋白质染色对蛋白质分离结果进行分析。


仪器参数

1. 提取蛋白质。
2. 样品处理:在蛋白样品中加入等量含有B-巯基乙醇的2x loading buffer,煮沸10分钟。  
3. 电泳准备配置合适浓度的SDS分离胶,安装电泳槽,注入1x 电泳液。 
4. 蛋白质样品上样:根据蛋白质浓度,取适量处理过的蛋白样品依次加入电泳孔槽内,另外取适量蛋白标准marker加入其他空余孔槽内。
5. 开始电泳接通电源,将电压调至120v,保持恒定电压。
6. 电泳结束剥离胶当溴酚蓝迁移至凝胶底部,停止电泳;将蛋白胶取出,并切去浓缩胶和分离胶底部的溴酚蓝胶条。
7. 染色使用R250染色液对蛋白胶染色1小时
8. 脱色使用脱色液对染色的蛋白胶脱色至背景干净,蛋白条带清晰可见
9. 拍照分析

检测项目

  1. 植物、动物、微生物样本。

  2. 蛋白质样本。

  3. 粗提的乳液、粘稠液体等。

样品要求
仪器简介

十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)是较常用的一种分离蛋白质的技术。SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此,各种蛋白质-SDS 复合物在电泳时的迁移速度仅由蛋白质分子量决定 ,不同的蛋白质由于分子量的差异经过SDS-PAGE电泳后分离,再经由蛋白质染色对蛋白质分离结果进行分析。


仪器参数

1. 提取蛋白质。
2. 样品处理:在蛋白样品中加入等量含有B-巯基乙醇的2x loading buffer,煮沸10分钟。  
3. 电泳准备配置合适浓度的SDS分离胶,安装电泳槽,注入1x 电泳液。 
4. 蛋白质样品上样:根据蛋白质浓度,取适量处理过的蛋白样品依次加入电泳孔槽内,另外取适量蛋白标准marker加入其他空余孔槽内。
5. 开始电泳接通电源,将电压调至120v,保持恒定电压。
6. 电泳结束剥离胶当溴酚蓝迁移至凝胶底部,停止电泳;将蛋白胶取出,并切去浓缩胶和分离胶底部的溴酚蓝胶条。
7. 染色使用R250染色液对蛋白胶染色1小时
8. 脱色使用脱色液对染色的蛋白胶脱色至背景干净,蛋白条带清晰可见
9. 拍照分析

测试项目
  1. 植物、动物、微生物样本。

  2. 蛋白质样本。

  3. 粗提的乳液、粘稠液体等。

样品要求
  1. 蛋白质样本约50ug,浓度1ug/ul以上。冰袋运输。

  2. 不纯样本,每样本需准备1ml,分装两管。冰袋运输。

备注:marker1:10-250KD,  marker2:10-180KD;需根据带分离目的蛋白大小选择maker及分离胶的浓度;一块胶有9个孔,可同时检测8个样本。


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