SDS-PAGE 变性蛋白质凝胶电泳
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品 牌
Bio-Rad 伯乐
型 号垂直电泳槽mini
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模 式
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选 项
- 地 址
北京
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价 格
80
- 联系人:易科学客服
- 联系电话:400-086-3999 转 801
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- 详细介绍
仪器简介
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)是较常用的一种分离蛋白质的技术。SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此,各种蛋白质-SDS 复合物在电泳时的迁移速度仅由蛋白质分子量决定 ,不同的蛋白质由于分子量的差异经过SDS-PAGE电泳后分离,再经由蛋白质染色对蛋白质分离结果进行分析。
仪器参数
1. 提取蛋白质。
2. 样品处理:在蛋白样品中加入等量含有B-巯基乙醇的2x loading buffer,煮沸10分钟。
3. 电泳准备: 配置合适浓度的SDS分离胶,安装电泳槽,注入1x 电泳液。
4. 蛋白质样品上样:根据蛋白质浓度,取适量处理过的蛋白样品依次加入电泳孔槽内,另外取适量蛋白标准marker加入其他空余孔槽内。
5. 开始电泳: 接通电源,将电压调至120v,保持恒定电压。
6. 电泳结束剥离胶: 当溴酚蓝迁移至凝胶底部,停止电泳;将蛋白胶取出,并切去浓缩胶和分离胶底部的溴酚蓝胶条。
7. 染色: 使用R250染色液对蛋白胶染色1小时
8. 脱色: 使用脱色液对染色的蛋白胶脱色至背景干净,蛋白条带清晰可见
9. 拍照分析
检测项目
植物、动物、微生物样本。
蛋白质样本。
粗提的乳液、粘稠液体等。
样品要求
仪器简介
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)是较常用的一种分离蛋白质的技术。SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此,各种蛋白质-SDS 复合物在电泳时的迁移速度仅由蛋白质分子量决定 ,不同的蛋白质由于分子量的差异经过SDS-PAGE电泳后分离,再经由蛋白质染色对蛋白质分离结果进行分析。
仪器参数
1. 提取蛋白质。
2. 样品处理:在蛋白样品中加入等量含有B-巯基乙醇的2x loading buffer,煮沸10分钟。
3. 电泳准备: 配置合适浓度的SDS分离胶,安装电泳槽,注入1x 电泳液。
4. 蛋白质样品上样:根据蛋白质浓度,取适量处理过的蛋白样品依次加入电泳孔槽内,另外取适量蛋白标准marker加入其他空余孔槽内。
5. 开始电泳: 接通电源,将电压调至120v,保持恒定电压。
6. 电泳结束剥离胶: 当溴酚蓝迁移至凝胶底部,停止电泳;将蛋白胶取出,并切去浓缩胶和分离胶底部的溴酚蓝胶条。
7. 染色: 使用R250染色液对蛋白胶染色1小时
8. 脱色: 使用脱色液对染色的蛋白胶脱色至背景干净,蛋白条带清晰可见
9. 拍照分析
测试项目
植物、动物、微生物样本。
蛋白质样本。
粗提的乳液、粘稠液体等。
样品要求
蛋白质样本约50ug,浓度1ug/ul以上。冰袋运输。
不纯样本,每样本需准备1ml,分装两管。冰袋运输。
备注:marker1:10-250KD, marker2:10-180KD;需根据带分离目的蛋白大小选择maker及分离胶的浓度;一块胶有9个孔,可同时检测8个样本。